کیت رنگ آمیزی آکریدین اورنج / پروپیدیوم یوداید (AO / PI)
450.000 تومان
کیت سنجش زیست پذیری سلول بر پایه آکریدین اورنج/پروپیدیوم یوداید (AO/PI)
مناسب برای 500 تست
غلظت بالا (26X)
برند: QMeDx
روش رنگ آمیزی:
1. 25 میکرولیتر از سوسپانسیون سلولی حاوی تعداد 500.000 تا 2.000.000 سلول را با یک میکرولیتر از محلول رنگ آمیزی مخلوط کرده و به آرامی و به طور کامل مخلوط می کنیم.
2. هر نمونه بایستی بلافاصله قبل از ارزیابی میکروسکوپی با رنگ مخلوط شود و نمونه ها سریعا زیر میکروسکوپ بررسی و سلول ها شمارش شوند.
3. 10 میکرولیتر از مخلوط نمونه را روی یک لام قرار داده و یک لامل روی آن قرار دهید. حداقل 300 سلول را با فیلتر فلوئورسین و بزرگ نمایی عدسی شیئی 60X شمارش کنید. توجه کنید که بسته به نوع سلول می توان بزرگ نمایی های متفاوت را انتخاب کرد به طوری که ساختار هسته قابل تمایز باشد.
تفسیر نتایج:
سلول های زنده و سالم به صورت یکنواخت سبز قابل مشاهده خواهند بود.
سلول های آپوپتوزی اولیه (زودرس) به سبزرنگ شده و حاوی نقاط درخشان سبز در هسته به دلیل متراکم شدن (condensation) کروماتین و تکه تکه شدن (fragmentation) هسته ای خواهند بود.
سلول های آپوپتوزی ثانویه (دیر رس) پروپیدیوم یوداید را جذب کرده و به رنگ نارنجی درخواهند آمد با این تفاوت که بر خلاف سلول های نکروتیک این سلول ها اکثرا دارای هسته های متراکم و قطعه قطعه شده خواهند بود.
سلول های نکروتیک نارنجی رنگ شده و ساختاری شبیه سلول های سالم و زنده داشته و فاقد هسته متراکم خواهند بود.
در صورتی که هدف فقط بررسی زیست پذیری سلول ها باشد نتایج به شکل زیر نمره دهی می شود:
تمام سلول هایی که کاملا یا به صورت جزئی نور نارنجی ساطع می کنند مرده و سایر سلول هایی که فقط نور سبز ساطع می کنند زنده در نظر گرفته می شوند.
دانلود راهنمای کیت brochure (ao/pi)
ناموجود
برای آشکارسازی تغییرات هسته ای و تشکیل جسم آپوپتوزی که از ویژگی های آپوپتوز است، از رنگ آمیزی آکریدین اورنج / پروپیدیوم یوداید (AO / PI) استفاده می شود. سلولها در زیر میکروسکوپ فلورسانس مشاهده می شوند و برای تعیین کمیت آپوپتوز شمارش می شوند.
رنگ آکریدین اورنج/پروپیدیوم یوداید یک رنگ برای بررسی زنده مانی سلول است که پس از اضافه شدن به سلول ها باعث می شود سلول های هسته دار زنده به رنگ سبز و سلول های مرده به رنگ قرمز درآیند.
آکریدین اورنج به سلول های زنده نفوذ کرده و به اسیدهای نوکلئیک متصل می شود. اتصال به dsDNA باعث می شود که آکریدین اورنج به رنگ سبزاز خود نور فلورسانت ساطع کند و اتصال به ssDNA یا RNA باعث فلورسانس قرمز می شود.
پروپیدیوم یوداید به اسیدهای نوکلئیک متصل می شود. از آنجایی که این رنگ قادر به عبور از غشای سلولی دست نخورده و سالم نیست و نمی تواند در آن نفوذ می کند، فقط توسط سلول های مرده و سلولهایی که غشای آسیب دیده دارند، جذب می شود. هنگامی که به اسیدهای نوکلئیک متصل می شود، فلورسانس آن 20-30 برابر افزایش می یابد و باعث می شود از سلول نور فلورسانت قرمز ساطع شود. به دلیل پدیده انتقال انرژی رزونانس Förster یا همان FRET، سیگنال یدید پروپیدیوم سیگنال آکریدین اورنج را در سلول های مرده جذب می کند و مانع سلول هایی با سیگنال مثبت برای هر دو رنگ یا double positive می شود.
اولین کسی باشید که دیدگاهی می نویسد “کیت رنگ آمیزی آکریدین اورنج / پروپیدیوم یوداید (AO / PI)”
محصولات مرتبط
آنتی بادی
آنتی بادی
آنتی بادی
مواد شیمیایی و محلول ها
مواد شیمیایی و محلول ها
مواد شیمیایی و محلول ها
آنتی بادی
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.